制備液相色譜技術(shù)(Preparative High Performance Liquid Chromatography, PHPLC),是一種在化學、制藥、生物技術(shù)等領(lǐng)域中廣泛使用的分離和純化方法。
制備液相色譜儀的使用注意事項:
1.流動相選擇:
-流動相應采用色譜純?nèi)軇?,避免使用有污染的水等沖洗色譜柱。
-嚴禁使用不相溶的溶劑,避免將互不相溶的溶劑一同進入泵內(nèi)。
-流動相需經(jīng)過濾、除氣后方可使用,以避免柱塞、密封環(huán)、缸體和單向閥等部件的磨損。
2.色譜柱維護:
-避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。
-調(diào)節(jié)流速時應該緩慢進行,以防止沖動柱內(nèi)填料。
-一般說來色譜柱不能反沖,除非生產(chǎn)者指明該柱可以反沖。
-選擇使用適宜的流動相(尤其是pH),以避免固定相被破壞。
-定期對色譜柱進行清洗和保養(yǎng),以延長其使用壽命。
3.儀器操作:
-嚴格按照實驗流程進行操作,確保實驗結(jié)果的準確性和可重復性。
-注意儀器的日常維護和校準,確保儀器的正常運行和數(shù)據(jù)的準確性。
-在使用新色譜柱前,應檢查柱中當前是何種溶劑,并確保其與分析樣品所用流動相互溶。
-在梯度洗脫時,要注意溶劑的互溶性,避免產(chǎn)生沉淀或析出鹽的微細晶體。
4.安全防護:
-使用有毒或腐蝕性化學品時,應佩戴適當?shù)膫€人防護裝備。
-確保實驗室通風良好,以避免有害氣體的積聚。
-遵守實驗室安全規(guī)定,妥善處理廢液和廢棄物。
制備液相色譜的測定步驟包括準備、裝柱與平衡、上樣與分離、檢測與收集以及數(shù)據(jù)分析等環(huán)節(jié)。在使用過程中需要注意流動相的選擇、色譜柱的維護、儀器的正確操作以及安全防護等方面的問題。